Каталог / БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ / Молекулярная биология

Анализ роли дистальных доменов десмоглеина 3 человека в нарушении адгезии между кератиноцитами при пузырчатке

Диссертация

Автор: Лысенко, Андрей Александрович

Заглавие: Анализ роли дистальных доменов десмоглеина 3 человека в нарушении адгезии между кератиноцитами при пузырчатке

Справка об оригинале: Лысенко, Андрей Александрович. Анализ роли дистальных доменов десмоглеина 3 человека в нарушении адгезии между кератиноцитами при пузырчатке : диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03 / Лысенко Андрей Александрович; [Место защиты: Ин-т биоорган. химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН] Москва, 2009 146 c. : 61 09-3/445

Физическое описание: 146 стр.

Выходные данные: Москва, 2009






Содержание:

Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Аутоиммунное заболевание - пузырчатка
Роль аутоантител в патогенезе пузырчатки
Внутриклеточные сигнальные пути и их роль при пузырчатке
Изменение качественного и количественного состава десмосом вследствие действия ВП-lgG j Экспериментальные модели для исследования патогенности аутоантител ,,
IgG антитела к десмоглеинам - основной класс антител, обнаруживаемых в сыворотке больных пузырчаткой
Генетические предпосылки, обуславливающие развитие пузырчатки
Структура и функции десмосом
Молекулярная архитектура десмосом
Десмосомальные кадгерины
Адгезионные взаимодействия между десмосомальными кадгеринами
Механизм образования димеров по типу «якорь-карман»
Cis- и trans- димеры - функциональная роль и механизм формирования
Специфичность адгезии, опосредованной кадгеринами
Адгезионные взаимодействия в десмосоме
Динамика формирования десмосом
Роль Са2+ в формировании и функционировании десмоомальных контактов
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
ГЛАВА1 Материалы и методы исследований
Система Bac-to-Bac для получния рекомбинантных белков в бакуловирусной системе экспрессии
Получение генетических конструкций, кодирующих разные домены десмоглеина 3 человека
Праймеры
Приготовление компетентных клеток для трансформации рекомбинантными векторами
Трансформация клеток Е coli штамма DH10 Вас1М векторами, кодирующими разные фрагменты десмоглеина 3 человека
Выделение плазмидной ДНК из клеток Е coli
Трансфекция клеток насекомых линии Sf9 рекомбинантной вирусной бакмидой
Реамплификация вирусного стока
Определение титра рекомбинантных вирусов
Выделение белков с исползованием метода №2+-аффиной хроматографии
Электрофорез в полиакриламидном геле
Иммуноблоттинг
Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА)
Выделение Ig из сыворотки иммунных кроликов и больных вульгарной пузырчаткой
Выделение фракции IgG из раствора эуглобулинов
Анализ участия IgG из сывороток иммунных кроликов в акантолизе кожи
Антитела, использованные в работе
Приготовление криосрезов из образцов человеческой кожи
Иммунофлуоресцентное окрашивание образцов кожи и клеток линий А431 и НаСаТ
ГЛАВА 2 Получение в бакуловирусной системе экспрессии рекомбинантных белков, соответствующих разным доменам десмоглеина 3 человека
21 Экспрессия генов Д1, Д2, Д1-2 и Д1-5 доменов ДСГЗ в бакуловирусной
22 Получение рекомбинантных белков, соответствующих разным доменам ДСГ 3 человека
23 Распознавание различных доменов ДСГЗ сыворотками больных пузырчаткой
24 Идентифиекация В-эпитопов ДСГЗ, распознаваемых сыворотками больных вульгарной пузырчаткой
25 Моделирование конформационных эпитопов ДСГЗ, распознаваемых сыворотками больных вульгарной пузырчаткой
ГЛАВА 3 Индукция акантолиза антителами к доменам 1-2 и 3-5 ДСГЗ человека
31 Получение кроличьих антител к ДСГЗ
32 Идентификация эпитопа ДСГЗ, распознаваемого коммерческими моноклональными антителами
33 Характеристика клеточных линий кератиноцитов человека
34 Характеристика экспрессии молекул адгезии в неонатальном эпидермисе человека
35 Роль антител к различным доменам ДСГЗ в нарушении адгезии между кератиноцитами
351 Нарушение адгезии между клетками эпидермиса антителами к дистальным доменам Д 1-2 ДСГЗ
352 Нарушение адгезии между клетками эпидермиса антителами к проксимальным доменам Д 3-5 ДСГЗ
36 Связывание антител к ДСГЗ с монослоем кератиноцитов человека линии НаСаТ
ГЛАВА 4 Роль ионов кальция в межклеточной адгезии и ее нарушениях
41 Зависимость адгезии в клетках НаСаТ разной степени плотности от ионов кальция
411 Плотность десмосом на мембранах гиперадгезивных и адгезивных кератиноцитов
412 Зависимость адгезии в гиперадгезионных клетках НаСаТ от концентрации ионов кальция
413 Зависимость адгезии в монослое клеток НаСаТ от концентрации
42 Роль синтеза десмосомальных кадгеринов de novo в сохранении гиперадгезии клеток НаСаТ
43 Роль температуры в сохранении адгезии клеток НаСаТ
44 Влияние антител к ДСГЗ на адгезию между клетками НаСаТ при низкой концентрации кальция
45 Влияние антител к ДСГЗ на адгезию между клетками НаСаТ при низкой концентрации кальция и комнатной температуре
46 Механизм нарушения адгезии между кератиноцитами
47 Различия механизмов действия антител к Д1-2 и ДЗ-5
48 Плотность десмосом на кератиноцитах кожи человека
49 Патогенные антитела к десмоглеину 3 уменьшают число десмосом в супрабазальном слое кератиноцитов кожи
ОБСУЖДЕНИЕ
Выводы
Благодарности



Похожие работы:
  • Диагностикум на основе рекомбинантного десмоглеина 3 человека для выявления циркулирующих аутоантител при вульгарной пузырчатке
  • Анализ взаимодействия доменов репликативного белка А человека с частичными ДНК-дуплексами методами ограниченного протеолитического расщепления и аффинной модификации
  • Исследование функциональных взаимодействий между границами регуляторных доменов гена Abd-B у Drosophila melanogaster
  • Растворимые комплексы антигенов адгезии в сыворотке крови человека
  • Пространственно-временная организация репликации субхромосомных доменов ДНК в ядрах клеток человека
  • Кинетический подход к адгезии тромбоцитов человека на поверхности материалов медицинского назначения
  • Обогащение культуры кератиноцитов человека стволовыми клетками путем селективной адгезии к белкам внеклеточного матрикса
  • Роль эндогенной интоксикации в нарушении гомеостаза организма человека при хронических дерматозах
  • Роль эндогенной интоксикации в нарушении гомеостаза организма человека при хронических дерматозах
  • Двигательная активность ресничек мерцательного эпителия при нарушении мукоцилиарного транспорта у человека